這是一個難以實現且難以證明的條件。盡管有許多化學物質（無機和有機）可以殺死微生物，但它們可能并不完全有效，并且會留下不良或有毒的殘留物。
紫外線和電離輻射也是有效的殺菌劑，破壞或修飾DNA以防止復制，但是紫外線不會產生有效的結果，也無法輕松驗證濕熱（蒸汽）滅菌可以提供的效果。如果jue對需要無菌，那么今天的科學家們就像他們的前任一樣，開始蒸蒸日上。
隨著周圍環境溫度的升高，微生物趨于變得更加活躍，-大多數（但不是全部）微生物死于176 o F 以上。對于Pr病毒，滅活的溫度和時間要求要高得多。蒸汽分子凝結在較涼的微生物上，每克蒸汽轉移2500焦耳，非常有效地將微生物加熱到被破壞的溫度。其他加熱方法的缺點是，干燥熱氣體的熱傳遞要低得多，邊界層效應會隔離和保護微生物。
為了zui大程度地發揮作用，蒸汽必須處于飽和狀態，并且可以輕松監控此條件以及蒸汽的溫度和壓力，從而有助于證明已發生滅菌。通過采用蒸汽滅菌技術，可以達到很高的無菌水平，實驗室和醫院使用的zui受歡迎的設備是蒸汽滅菌器或高壓滅菌器。
