干熱滅菌效果的監測

         

        在醫院和生物實驗室所使用的干熱滅菌設備主要是電干熱干烤箱和遠紅外線干烤箱。對干熱滅菌效果監測比較簡單,主要有兩種手段。在使用中按以下要求進行。
         
          (一)工藝監測
         
          1. 保證足夠的溫度與時間  干熱滅菌在一定的溫度下保持足夠的時間,如160℃、120min\170℃60min\180℃、30min。
         
          2. 滅菌物品必須清潔干燥  干熱穿透性不強、不干凈的物品容易造成滅菌不徹底。
         
          3. 合適的包裝 干熱滅菌物品的包裝材料shou先能耐高溫,金屬傳導型烤箱內不適宜放大件包裝,對流型烤箱對包裝大小不太嚴格,但亦不能高于烤箱高度的2/3。
         
          4. 正確擺放   干熱滅菌箱內物品擺放應安排有序,不能雜亂無章,裝量不能過滿,應留有一定的空隙。
         
        (二)、干熱滅菌效果監測辦法
         
          1、化學監測法
         
          (1)、檢測方法:將既能指示溫度又能指示溫度持續時間的化學指示劑3個~5個分別放入待滅菌的物品中,并置于滅菌器**難達到滅菌的部位。經一個滅菌周期后,取出化學指示劑,據其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。
         
          (2)、結果判定:檢測時,所放置的指示管顏色及性狀均變**規定的條件,則判為達到滅菌條件;若其中之一未達到規定的條件,則判為未達到滅菌條件。
         
          (3)、注意事項:檢測所有的化學指示劑需經衛生部認可,并在有效期內使用。
         
          2、生物指示劑檢測法
         
          (1)、生物指示劑指示菌株:枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372),菌片含量為5.0×105 cfu/片~5×106cfu/片。其抗力應符合以下條件:在溫度160℃±2℃時,其D值為1.3~1.9min,存活時間≥3.9min,殺滅時間≤19min。
         
          (2)、檢測方法:將枯草桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌試管內(1片/管)。滅菌器與每層門把手對角線內,外角處放置2個含菌片的試管,試管帽置于試管旁,關好柜門,經一個滅菌周期后,待溫度降**80℃時,加蓋試管帽后取出試管。在無菌條件下,加入普通營養肉湯培養基(5ml/管),以36℃±1℃培養48h,觀察初步結果,無菌生長管繼續培養**第七日。
         
          (3)、結果判定:若每個生物指示菌片接種的肉湯管均澄清,判為滅菌合格,若指出菌片之一接種的肉湯管混濁,判為不合格,對難以判定的肉湯管,取0.1ml接種于營養瓊脂平板,用滅菌L 棒涂勻,放36℃±1℃培養48h,觀察菌落形態,并做涂片染色鏡檢,判斷是否有指示菌生長,若有指示菌生長,判為不合格;若無指示菌生長,判為滅菌合格。
         
          (4)、注意事項:檢測所有的生物指示菌片需經衛生部認可,并在有效期內使用。
         
          干熱滅菌效果的生物監測亦為G際標準菌株制備的的生物指示劑,即通用枯草桿菌黑色變種芽孢ATCC9372,用該細菌芽孢懸液定量沾染在特定(0.5cm×2.0cm)濾紙上,制成的干燥菌片,每片裝入一個透氣性紙袋內,這種芽孢菌片對干熱的標準抗力:在160℃干熱條件下染菌量為5×105~5×106cfu/片,D值1.3~1.9min。
         
          監測時將菌片放于玻璃平皿內,分布與上中層中央和底層內中外等5個點,每點兩片;也可直接布放于不同位置的滅菌包內。待滅菌結束時溫度冷卻時取出,在無菌室內于無菌條件下將菌片接種到營養湯管內,于37℃溫箱內培養72h觀察結果,當肉湯出現渾濁表示有菌生長,判定為滅菌不合格;肉湯仍然清澈透明則表示無菌生長,判定為滅菌合格。
         
          每次監測設備必須設陽性對照并且應生長正常。
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